一般做液相要用到對照品，但有的物質(zhì)是沒有色譜標(biāo)準品的，大家就常說那是對照品，純度都可以達到98%，但是到底對照品和色譜標(biāo)準品有一個嚴格的界定呢?還有，做內(nèi)標(biāo)法，說用的是內(nèi)標(biāo)物，這個內(nèi)標(biāo)物和對照品和色譜標(biāo)準品又有什么不同呢?

將一個已知質(zhì)量，樣品中不含有雜質(zhì)的純物質(zhì)，加入至待測樣品溶液中，以此純物質(zhì)的量為標(biāo)準，對比測定待測組分的含量，該純物質(zhì)稱為內(nèi)標(biāo)物。

內(nèi)標(biāo)物需滿足下列要求:能溶解于樣品中，且不與待測組分發(fā)生化學(xué)作用;峰位盡可能與待測組分的峰位靠近，但能與待測組分開(分離度R≥1.5)的純物質(zhì)。若得不到純品，必須預(yù)先測定其準確含量，且雜質(zhì)峰不得干擾待測組分峰。內(nèi)標(biāo)物有時不易尋找是內(nèi)標(biāo)法的缺點。

此外，還應(yīng)滿足以下條件:

1、內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì);

2、它必須溶于試樣中，并與試樣中各組分的色譜峰能分離;

3、加入內(nèi)標(biāo)物的量應(yīng)接近于被測組分;

4、色譜峰的位置應(yīng)與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。

對照品是指用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標(biāo)準物質(zhì)，采用化學(xué)方法來測定，即是一般儀器的都叫做對照品。

對照品分為色譜標(biāo)準品和工作對照品，必須經(jīng)過標(biāo)定之后才可使用。

舉個例子，藥典規(guī)定若是血液制品，用來對照的叫色譜標(biāo)準品，若是藥材，用作對照的叫對照品，內(nèi)標(biāo)物一般是在用內(nèi)標(biāo)法測揮發(fā)性成分時加入的物質(zhì)。這樣會不會好理解—點?

對于內(nèi)標(biāo)法定量分析來說，內(nèi)標(biāo)物的選擇是極其重要的。

它必須滿足如下的條件:

1、內(nèi)標(biāo)物與被分析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要相似;

2、內(nèi)標(biāo)物應(yīng)能溶解于被測樣品(或溶劑)中，且不與被測樣品起化學(xué)反應(yīng);

3、內(nèi)標(biāo)物的出峰位置應(yīng)該與被分析物質(zhì)的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是為了避免GC的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異;

4、選擇合適的內(nèi)標(biāo)物加入量，使得內(nèi)標(biāo)物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應(yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。

色譜標(biāo)準品、對照品系指用于鑒別、檢查、含量測定的標(biāo)準物質(zhì)。色譜標(biāo)準品與對照品(不包括色譜用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)）均由國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的單位制備、標(biāo)定和供應(yīng)。色譜標(biāo)準品系指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標(biāo)準物質(zhì)，按效價單位(或ug)計，以色譜標(biāo)準品進行標(biāo)定;對照品除另有規(guī)定外，均按干燥品(或無水物）進行計算后使用。

色譜標(biāo)準品與對照品的建立或變更其原有活性成分和含量，應(yīng)與原色譜標(biāo)準品、對照品或色譜標(biāo)準品進行對比，并經(jīng)過協(xié)作標(biāo)定和一定的工作程序進行技術(shù)審定。

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